服务介绍
针对各类RNA分子，例如mRNA/lncRNA的保守结构域及circRNA的接头序列进行靶向设计siRNA序列，对于每条选定的siRNA靶序列，设计正义链和反义链，以loop（9nt or 10nt）相连，构建shRNA质粒直接转染或通过病毒包装后转染细胞，并对转染细胞进行阳性鉴定和转代细胞株的培养，最终实现对特定RNA特异性敲低的作用。
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干扰分子类型 |
载体名称 |
抗性 |
荧光标记 |
应用 |
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瞬转细胞 |
包装慢病毒 |
包装腺相关AAV病毒 |
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mRNA/lncRNA/circRNA |
pLV3-U6-shRNA-Negative-Control-CopGFP-Puro |
AmpR/PuroR |
GFP |
√ |
√ |
× |
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XM02 scAAV.U6.shRNA.CMV.EGFP.WPRE.SV40pA |
AmpR |
GFP |
√ |
× |
√ |
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技术优势
1. shRNA载体转染效率高、操作简单、RNA沉默效果易于检测；
2. 评估挑选特异靶向序列构建载体；
项目明细
1. 载体构建；
2. 瞬时转染；
3. 特异性引物设计合成；
4. RT-qPCR验证；
5. Sanger测序验证。
客户提供
1. 基因ID/物种/全长序列
2. 载体名称
我们提供
1. shRNA质粒；
2. 目的载体：10μg质粒+200μL甘油菌；
3. 对照载体：10μg质粒+200μL甘油菌；
4. 载体构建与验证实验报告：
① 载体构建步骤；
② 载体测序验证结果原始文件；
③ 细胞转染实验步骤；
④ qPCR实验流程方案及产物测序；
⑤ 载体构建与验证实验报告。
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