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胶原酶 来源于溶组织梭菌
胶原酶 来源于溶组织梭菌
Sigma
C0130-100MG
773.36

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产品信息
商品描述

(1)一般描述

胶原酶是一种可切割被称为胶原蛋白的三螺旋蛋白的蛋白酶。存在有三种类型的组织胶原酶,而它们都属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。从溶组织梭菌中获得的胶原酶具有非常强的活性,因为它可在低至4-10℃的温度下从两端对胶原蛋白进行消化。粗胶原酶混合物含有两种主要的酶类型,即胶原酶和梭菌蛋白酶。

 

(2)应用

来自溶组织梭菌的胶原酶在生物学研究中具有广泛的用途,它可用于制备分离的细胞悬浮液。该产品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。它还被证明可有效用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞的制备。 胶原酶已用于研究晚期糖基化终产物所需的动脉组织的制备。该酶已经测试可以约1 mg/mL的浓度释放肝细胞。用于消化的浓度范围是0.1至5 mg/mL。

 

(3)生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。

该胶原酶产物是由溶组织梭菌所分泌的酶混合物组成,且不同的产物可通过在分泌酶中所发现的10-18种化合物的比例而进行区分。 主要的成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白及其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞是必需的。 不同类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

 

(4)制备说明

该产品相当于最初的40%硫酸铵部分 Mandl, I., et al.,J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).溶液通常是在TESCA缓冲液(含有50mM TES、0.36mM氯化钙,37℃时pH 7.4)中按1-2 mg/mL进行制备。

 

(5)其他说明

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。

 

(6)免责声明

本品可在2-8°C稳定保存一年。 37°C、50°C和-20°C下,30天内没有FALGPA或蛋白酶活性损失。将胶原蛋白酶粗品溶液分装(at 10 mg/mL)后快速冷冻,并在-20°C保存,可保持稳定。 后续的冻融循环会损坏溶液。 当在冰上保持时,该产品可在7小时内保持100%活性。

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773.36