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蛋白酶K是枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶。重组酶与最初从白色念球菌(Tritirachium album)中分离出来的天然蛋白酶相同。重组酶的规格与天然蛋白酶的规格相同。氨基酸序列（分子量）和分子结构相同。但是，重组酶比天然酶的纯度更高，因为它不含DNA，无明显的切割特异性。该酶对天然蛋白质非常有效，因此，可快速灭活内源核酸酶，如RNA酶和DNA酶。该酶还具有溶液形式。
 

• 抑制剂：该酶可被Pefabloc® SC灭活。但是，它不会被金属离子、螯合剂（如EDTA）、巯基试剂或胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶抑制剂灭活。
• 激活剂：变性剂（SDS和尿素）可刺激蛋白酶K的活性。
• 最适pH：蛋白酶K在较广的pH范围内（4-12.5）均有活性。当在pH 6.5-9.5条件下孵育时，该酶可在几个小时内保持全部活性。
• 体积活度：

约2.5 U/mg冻干品（chromozyme测定）
约30 U/mg冻干品（血红蛋白测定）

注：SDS可使蛋白酶K的活性增加七倍。

Approximately 2.0 U/mg lyophilizate (2.5 U/mg protein) when assayed with the Chromozym assay (equivalent to 24 U/mg lyophilizate [30 U/mg protein] with the hemoglobin assay).

特异性

蛋白酶K是已知最活跃的内肽酶之一，并且未表现出明显的切割特异性。蛋白酶K切割蛋白质的方式如下所述：X-↓-Y，其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸，Y = 任何氨基酸。当过量使用和长时间孵育时，该酶可将蛋白质材料分解成游离氨基酸。

应用

蛋白酶K是已知最活跃的内肽酶之一。该PCR级蛋白酶K特别适用于分离核酸以用于扩增反应，以及：
 

• 该酶对天然蛋白质非常有效，因此，可用于在核酸分离过程中快速灭活内源核酸酶，如RNA酶和DNA酶。这种特性使蛋白酶K特别适用于从组织或细胞中分离天然RNA和DNA。
• 该酶通过激活细菌自溶因子而促进细胞裂解。
• 该酶通过修饰细胞表面的蛋白质和糖蛋白来分析膜结构。
• 由于该酶经过测试不含RNA酶和DNA酶，并且几乎不含DNA，因此，它特别适用于分离PCR和RT-PCR模板。
• 蛋白酶K也可在菌落转移准备过程中用于去除细胞碎片，以及用于处理组织切片以确保在原位杂交过程中实现有效的探针浸润。

特点和优势

蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶，无明显的切割特异性。它能够切割氨基酸X和Y（X-↓-Y）之间的蛋白质，其中X =脂族、芳族或疏水氨基酸，Y = 任何氨基酸。该酶对天然蛋白质非常有效，因此，可快速灭活内源核酸酶，如RNA酶和DNA酶。

• 选择一种有效的模板制备工具。可灭活大多数物种的DNA酶和RNA酶。
• 注重一致的质量和性能。严格的质量测试确保了最佳的稳定性和高水平的批次间性能一致性。
• 适用于各种条件下的样品制备。这款强大的酶可在很广的pH范围内保持稳定，是各种应用的理想选择。
• 受益于无污染的酶。该酶经过测试，不含RNA酶和DNA酶，并且几乎不含DNA。它特别适用于PCR模板的分离。