基于CRISPR/Cas9的基因敲入/敲出细胞系构建

发布日期:2020-08-14 00:00

CRISPR系统是细菌和古细菌为应对病毒和外源质粒的攻击演化而来的获得性免疫防御机制,经改造可用于人类细胞、大鼠、小鼠等多种模式生物的基因编辑。CRISPR/Cas9系统由sgRNA(single-guide RNA)和Cas9蛋白两个作用元件组成,sgRNA引导Cas9蛋白识别并切割基因组特定位点形成双链断裂(DSB, double strand break),细胞随之利用非同源末端连接(NHEJ)和同源重组修复(HDR)对双链断裂进行修复。非同源末端连接是一种易错易突变的修复途径,容易导致断裂位点插入或缺失数个碱基,从而引起目标基因移码突变或提前终止;同源重组修复则需要引入外源修复模板,实现精准的基因插入和替换。

新开源晶锐专注于利用CRISPR技术推动基础科研和医药行业的不断发展。我们拥有专业的技术团队和完善的基因组编辑平台,致力于为客户提供基于CRISPR技术的sgRNA载体构建、基因敲除、基因敲入、转录激活、转录抑制、单位点甲基化修饰、单碱基编辑、高通量sgRNA文库筛选等全套基因编辑服务。

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